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            單克隆抗體制備技術的應用案例

            發布時間:2022-05-17   點擊次數:129次
              單克隆抗體制備是相對于多克隆抗體而言的。單克隆抗體指由單一的漿細胞克隆所產生的高度均一、僅針對某一抗原表位的抗體。當機體受到抗原刺激后,B淋巴細胞被抗原決定簇激活,增殖分化出大量的漿細胞,而后由漿細胞分泌出特異性抗體。1957年,生物學家伯內特提出了克隆選擇學說:動物的每個B淋巴細胞都有其*的受體,在受到外界抗原刺激時,特定的B細胞會發生免疫反應,迅速增殖分化產生相應抗體,抵御抗原的入侵。
             
              隨后,人們發現無論是在體內的腫瘤細胞還是移植到體外培養的腫瘤細胞都具有無限傳代的特點,1975年,英國科學家將壽命長但不能產生特異性抗體的小鼠骨髓瘤細胞與壽命短但經免疫后可產生特異性抗體的漿細胞在體外進行融合,創建了雜交瘤技術。該技術所產生的雜交瘤細胞既可以分泌我們所需的特異性抗體,又具有癌細胞無限繁殖的能力。
             
              單克隆抗體制備技術的應用:
              1.檢驗醫學診斷試劑
              作為檢驗醫學實驗室的診斷試劑,單克隆抗體以其特異性強、純度高、均一性好等優點,廣泛應用于酶聯免疫吸附試驗、放射免疫分析、免疫組化和流式細胞儀等技術。并且單克隆抗體的應用,很大程度上促進了商品化試劑盒的發展。應用單克隆抗體制作的商品化試劑盒廣泛應用于:①病原微生物抗原、抗體的檢測;②腫瘤抗原的檢測;③免疫細胞及其亞群的檢測;④激素測定;⑤細胞因子的測定。
              2.蛋白質的提純
              單克隆抗體是親和層析中重要的配體。將單克隆抗體吸附在一個惰性的固相基質上,并制備成層析柱。當樣品流經層析柱時,待分離的抗原可與固相的單克隆抗體發生特異性結合,其余成分不能與之結合。將層析柱充分洗脫后,改變洗脫液的離子強度或pH,與分離的抗原與抗體解離,收集洗脫液便可得到欲純化的抗原。
              3.腫瘤的導向治療和放射免疫顯像技術
              將針對某一腫瘤抗原的單克隆抗體與化療藥物或放療物質連接,利用單克隆抗體的導向作用,將藥物或放療物質攜帶至靶器官,直接殺傷靶細胞,稱為腫瘤導向治療。另外,將放射性標記物與單克隆抗體連接,注入患者體內可進行放射免疫顯像,協助腫瘤的診斷。
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